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(E1C4细胞)人胚胎干细胞 细胞生长:贴壁生长 细胞数量:1×106个细胞数 细胞纯度:92% 细胞活力:96%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion) 细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS) 细胞运输:干冰运输(1Vial)或活细胞运输(T-25flasks) 细胞用途:只可用于科研不可用于临床诊断和治疗 (E1C4细胞)人胚胎干细胞培养条件: 1、培养基:RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗+800ng/ml Taxol 2、温度:37.0°C 3、气体:空气 95%,CO2 5% (E1C4细胞)人胚胎干细胞培养方法: 收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况: 如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。 如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下: a,弃去培养液,用PBS洗1-2次。 b,向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。 c,加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养 d,传代比例:1:2-1:3 温馨提示:培养瓶里面的培养液是加入*高药物浓度的,为800ng/ml。我们采取缓慢增加药物的梯度的方法。具体步骤是,首先加含200ng/mlTaxol药物的培养液,放入培养箱,这段时间会有小部分细胞悬浮起来,属于正常情况,通过换液可以去掉,等细胞待长满就可以消化传代了,这时可以一直用含药物培养液来消化培养细胞,一两代之后就可以将药物浓度提高到500ng/ml,两代后可以将药物浓度提高至*高水平800ng/ml,含药物培养液用于细胞培养都没有问题,冻存的时候就不要在冻存液里加药物了。 (E1C4细胞)人胚胎干细胞保存和应用: 客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。 (E1C4细胞)人胚胎干细胞复苏的原则: 在实际操作中,冻存细胞要进行复苏,再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化,以避免慢速融化水分渗入细胞内,再次形成胞内结晶损伤细胞。 如何选购上等的(E1C4细胞)人胚胎干细胞? 1)该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。 2)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。 3)仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 4)用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 5)请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买我司提供的完全培养基。 (E1C4细胞)人胚胎干细胞售后服务: 1)发货时附:细胞实拍图片两张、细胞培养说明、细胞操作处理方法、细胞质量问题反馈表等。 2)细胞污染问题,请在收到产品48小时内给我们真实的实验结果;细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们真实的实验结果,我们调查核实后予免费调换,不收取任何费用。 3)如用户收到细胞8-15天之内因处理不当造成细胞死亡或污染,我公司将以6.5折优惠价重新提供一株原细胞。 4)如用户在16-30天内因处理不当造成细胞死亡或污染,我公司将以8折优惠价重新提供一株原细胞。
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