名称:小鼠胚胎干细胞 CE-3
种属:小鼠
组织来源: 胚胎
生长特征: 贴壁细胞
生长形态: 上皮维
培养体系: 90%DMEM(高糖)培养基+10%胎牛血清+1%双抗
背景描述: CE3 细胞系衍生自 D3 ES 细胞系
传代比例: 1:2 1:3
培养条件: 温度:37℃ 气象:空气 95%;CO2:5%
细胞冻存: 90%FBS+10%DSMO;推荐使用无血清冻存液
储存 -80°;长期保存液氮
倍增时间: 36hours 消化 3-5 分钟
收到细胞后请第一时间观察拍照并严格按照以下要求进行操作(需遵照无菌操作要求)。
细胞接收处理:
1. 观察包装有无漏液、浑浊、破损等情况。有问题请及时拍照反馈销售人员。
2. 用 75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。细胞在培养瓶中 培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法,因经过运 输贴壁细胞可能会有少许脱落;不用拧开培养瓶盖.将细胞置于培养箱中静置 3-4 小时,稳定细胞状态。
3. 3-4 小时后,取出细胞培养瓶,观察、拍照,观察记录细胞在运输过程中是 否有污染情况 4. 贴壁细胞:若细胞生长密度超过 80%.可正常传代;细胞密度若小于 80%,可 将 细胞培养瓶内培养基吸出,预留 5ml-6ml 培养液继续培养,细胞密度超过 80% 可再次传代操作。 悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至 50ml 无菌离心管 内,1000rpm 离心 5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入 5ml 培养基吹打重悬。镜下观察时,若细胞密度超过 80%,可将细胞悬液分至 2 个细 胞培养瓶内培养,补加培养基至 5ml;若细胞密度未超过 80%, 将细胞悬液移至 原瓶继续培养,直至细胞密度达 80%左右时再进行传代操作。