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细胞名称:CTLL-2,小鼠T淋巴细胞 规格:T25瓶或者2ml冻存管 生长特性:悬浮生长传代比例:持细胞浓度在1×105~2×106/ml 培养条件:90%RPMI-1640,10%胎牛血清(优质),100U/ml rmIL-2,100U/ml双抗,37℃,5%CO2 冻存条件:70%基础培养基+20%FBS+10%DMSO 仅供科研使用,不可用于临床诊断和治疗 冻存细胞接收后的处理: 1)干冰运输,收到细胞后推荐直接复苏1管,另一管放入-80度冰箱保存过夜后转入液氮,细胞直接转入液氮暂存可能导致细胞复苏率降低。 2)收到细胞后,若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。 复苏细胞接收后的处理: 1)收到细胞后,请首先检查培养瓶是否破损或漏液,培养液是否混浊,如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。 2)在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片2~3组以及培养瓶外观照留存。 3)75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后,镜检观察细胞密度未达到80-90%时,将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1000rpm离心5min,离心后弃去上清,用新鲜完全培养基重悬后加入T25培养瓶或60mm皿中,补加适量培养基,T25培养瓶加6-8ml培养基。 4)如您收到细胞7天内没有反馈相关问题,出现的细胞问题将不提供免费重发服务。 注:发货用培养基不可再次用来培养细胞 细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①收集所有细胞悬液,1000rpm离心5min,小心弃去上清; ②加1-2ml新鲜完全培养基吹匀重悬后按照1:2比例加入2个T25培养瓶或60mm皿中,补加适量培养基,T25培养瓶加6-8ml培养基; 注:第一次传代推荐1:2传代,后续可根据细胞生长以及客户需求自行确定。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml新鲜完全培养基吹匀,将细胞悬液加入T25培养瓶或者60mm培养皿中,补加适量培养基,T25培养瓶加6-8ml培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存 ①收集所有细胞悬液,可细胞计数,1000rpm离心5min,弃上清; ②加入配制好的冻存培养液重悬细胞,冻存液的添加量按细胞最终浓度为1~10×106/ml添加。 ③将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
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