血浆 ctDNA KRAS/NRAS/EGFR/ BRAF/MET 基因突变检测国家参考品
National reference materials for detection of KRAS/NRAS/EGFR/
BRAF/MET gene mutation in plasma ctDNA
【类别】体外诊断试剂参考品
【性状】血浆样本
【用途】参考品原料系提取自野生型或各种基因突变细胞系基因组
DNA,经酶切打断后,加入血浆样本中。用于以血浆 ctDNA 中
KRAS/NRAS/EGFR/ BRAF/MET/PIK3CA 基因突变检测试剂盒的性能评
价:准确性、特异性及检测限,适用于高通量测序(即第二代测序技
术,NGS)、数字 PCR 法、实时荧光 PCR 法。(注:其他方法学产品用
户需自行证明其适用性)
【组成和规格】87 支/套,4.2mL/支,具体组成为:
序号 SampleID 突变位点 理论突变频率 氨基酸突变 CosmicID 参考品分类 其他突变位点
1 其他突变位点 2
1 CP-000 野生型 / / / 阴性参考品 / /
2 CP_001_01 KRAS p.G12D 3.00%
p.G12D COSM521
阳性参考品 PIK3CA:p.H1047
R
/
3 CP_001_02 KRAS p.G12D 1.00%
p.G12D COSM521
检测限参考品 PIK3CA:p.H1047
R
/
4 CP_001_03 KRAS p.G12D 0.30%
p.G12D COSM521
检测限参考品 PIK3CA:p.H1047
R
/
5 CP_001_04 KRAS p.G12D 0.10%
p.G12D COSM521
检测限参考品 PIK3CA:p.H1047
R
/
6 CP_003_01 KRAS p.G12C 3.00% p.G12C COSM516 阳性参考品 / /
7 CP_003_02 KRAS p.G12C 1.00% p.G12C COSM516 检测限参考品 / /
8 CP_003_03 KRAS p.G12C 0.30% p.G12C COSM516 检测限参考品 / /
9 CP_003_04 KRAS p.G12C 0.10% p.G12C COSM516 检测限参考品 / /
10 CP_004_01 KRAS p.G12A 3.00% p.G12A COSM522 阳性参考品 / /
11 CP_004_02 KRAS p.G12A 1.00% p.G12A COSM522 检测限参考品 / /
12 CP_004_03 KRAS p.G12A 0.30% p.G12A COSM522 检测限参考品 / /
13 CP_004_04 KRAS p.G12A 0.10% p.G12A COSM522 检测限参考品 / /
14 CP_005_01 KRAS p.G13D 3.00% p.G13D COSM532 阳性参考品 PIK3CA:p.E545K PIK3CA:p.D549N
15 CP_005_02 KRAS p.G13D 1.00% p.G13D COSM532 检测限参考品 PIK3CA:p.E545K PIK3CA:p.D549N
16 CP_005_03 KRAS p.G13D 0.30% p.G13D COSM532 检测限参考品 PIK3CA:p.E545K PIK3CA:p.D549N
17 CP_005_04 KRAS p.G13D 0.10% p.G13D COSM532 检测限参考品 PIK3CA:p.E545K PIK3CA:p.D549N
18 CP_006_01 KRAS p.G12S 3.00% p.G12S COSM517 阳性参考品 / /
19 CP_006_02 KRAS p.G12S 1.00% p.G12S COSM517 检测限参考品 / /
20 CP_006_03 KRAS p.G12S 0.30% p.G12S COSM517 检测限参考品 / /
21 CP_006_04 KRAS p.G12S 0.10% p.G12S COSM517 检测限参考品 / /
22 CP_007_01 KRAS p.G13C 3.00% p.G13C COSM527 阳性参考品 / /
23 CP_007_02 KRAS p.G13C 1.00% p.G13C COSM527 检测限参考品 / /
24 CP_007_03 KRAS p.G13C 0.30% p.G13C COSM527 检测限参考品 / /
25 CP_007_04 KRAS p.G13C 0.10% p.G13C COSM527 检测限参考品 / /
26 CP_009_01 NRAS p.Q61K 3.00% p.Q61K COSM580 阳性参考品 BRAF:p.L597V TP53:p.V157F
27 CP_009_02 NRAS p.Q61K 1.00% p.Q61K COSM580 检测限参考品 BRAF:p.L597V TP53:p.V157F
28 CP_009_03 NRAS p.Q61K 0.30% p.Q61K COSM580 检测限参考品 BRAF:p.L597V TP53:p.V157F
29 CP_009_04 NRAS p.Q61K 0.10% p.Q61K COSM580 检测限参考品 BRAF:p.L597V TP53:p.V157F
30 CP_010_01 NRAS p.Q61R 3.00% p.Q61R COSM584 阳性参考品 / /
31 CP_010_02 NRAS p.Q61R 1.00% p.Q61R COSM584 检测限参考品 / /
32 CP_010_03 NRAS p.Q61R 0.30% p.Q61R COSM584 检测限参考品 / /
33 CP_010_04 NRAS p.Q61R 0.10% p.Q61R COSM584 检测限参考品 / /
34 CP_011_01 BRAF p.V600E 3.00% p.V600E COSM476 阳性参考品 MAP2K1:p.P124S /
35 CP_011_02 BRAF p.V600E 1.00% p.V600E COSM476 检测限参考品 MAP2K1:p.P124S /
36 CP_011_03 BRAF p.V600E 0.30% p.V600E COSM476 检测限参考品 MAP2K1:p.P124S /
37 CP_011_04 BRAF p.V600E 0.10% p.V600E COSM476 检测限参考品 MAP2K1:p.P124S /
38 CP_012_01 BRAF p.469A 3.00% p.G469A COSM460 阳性参考品 / /
39 CP_012_02 BRAF p.469A 1.00% p.G469A COSM460 检测限参考品 / /
40 CP_012_03 BRAF p.469A 0.30% p.G469A COSM460 检测限参考品 / /
41 CP_012_04 BRAF p.469A 0.10% p.G469A COSM460 检测限参考品 / /
42 CP_013_01 BRAF p.L597V 3.00% p.L597V COSM470 阳性参考品 NRAS:p.Q61K TP53:p.V157F
43 CP_013_02 BRAF p.L597V 1.00% p.L597V COSM470 检测限参考品 NRAS:p.Q61K TP53:p.V157F
44 CP_013_03 BRAF p.L597V 0.30% p.L597V COSM470 检测限参考品 NRAS:p.Q61K TP53:p.V157F
45 CP_013_04 BRAF p.L597V 0.10% p.L597V COSM470 检测限参考品 NRAS:p.Q61K TP53:p.V157F
46 CP_014_01 PI3KCA p.E542K 3.00% p.E542K COSM760 阳性参考品 KRAS:p.G13D /
47 CP_014_02 PI3KCA p.E542K 1.00% p.E542K COSM760 检测限参考品 KRAS:p.G13D /
48 CP_014_03 PI3KCA p.E542K 0.30% p.E542K COSM760 检测限参考品 KRAS:p.G13D /
49 CP_014_04 PI3KCA p.E542K 0.10% p.E542K COSM760 检测限参考品 KRAS:p.G13D /
50 CP_015_01 PIK3CA p.E545K 3.00% p.E545K COSM763 阳性参考品 MET:c.3028+1G>
T
/
51 CP_015_02 PIK3CA p.E545K 1.00% p.E545K COSM763 检测限参考品 MET:c.3028+1G>
T
/
52 CP_015_03 PIK3CA p.E545K 0.30% p.E545K COSM763 检测限参考品 MET:c.3028+1G>
T
/
53 CP_015_04 PIK3CA p.E545K 0.10%
p.E545K COSM763
检测限参考品 MET:c.3028+1G>
T
/
54 CP_016_01 PIK3CA p.H1047R 3.00% p.H1047R COSM775 阳性参考品 KARS:p.G12V /
55 CP_016_02 PIK3CA p.H1047R 1.00% p.H1047R COSM775 检测限参考品 KARS:p.G12V /
56 CP_016_03 PIK3CA p.H1047R 0.30% p.H1047R COSM775 检测限参考品 KARS:p.G12V /
57 CP_016_04 PIK3CA p.H1047R 0.10% p.H1047R COSM775 检测限参考品 KARS:p.G12V /
58 CP_017_01 PIK3CA p.H1047L 3.00% p.H1047L COSM776 阳性参考品 KRAS:p.G12D /
59 CP_017_02 PIK3CA p.H1047L 1.00% p.H1047L COSM776 检测限参考品 KRAS:p.G12D /
60 CP_017_03 PIK3CA p.H1047L 0.30% p.H1047L COSM776 检测限参考品 KRAS:p.G12D /
61 CP_017_04 PIK3CA p.H1047L 0.10% p.H1047L COSM776 检测限参考品 KRAS:p.G12D /
62 CP_018_01 EGFR p.T790M 3.00% p.T790M COSM6240 阳性参考品 EGFR:p.L858R TP53 p.R273H
63 CP_018_02 EGFR p.T790M 1.00% p.T790M COSM6240 检测限参考品 EGFR:p.L858R TP53 p.R273H
64 CP_018_03 EGFR p.T790M 0.30% p.T790M COSM6240 检测限参考品 EGFR:p.L858R TP53 p.R273H
65 CP_018_04 EGFR p.T790M 0.10% p.T790M COSM6240 检测限参考品 EGFR:p.L858R TP53 p.R273H
66 CP_019_01 EGFR p.G719S 3.00% p.G719S COSM6252 阳性参考品 MAP2K1:p.Q56P /
67 CP_019_02 EGFR p.G719S 1.00% p.G719S COSM6252 检测限参考品 MAP2K1:p.Q56P /
68 CP_019_03 EGFR p.G719S 0.30% p.G719S COSM6252 检测限参考品 MAP2K1:p.Q56P /
69 CP_019_04 EGFR p.G719S 0.10% p.G719S COSM6252 检测限参考品 MAP2K1:p.Q56P /
70 CP_020_01 EGFR p.L858R 3.00% p.L858R COSM6224 阳性参考品 EGFR:p.T790M TP53 p.R273H
71 CP_020_02 EGFR p.L858R 1.00% p.L858R COSM6224 检测限参考品 EGFR:p.T790M TP53 p.R273H
72 CP_020_03 EGFR p.L858R 0.30% p.L858R COSM6224 检测限参考品 EGFR:p.T790M TP53 p.R273H
73 CP_020_04 EGFR p.L858R 0.10% p.L858R COSM6224 检测限参考品 EGFR:p.T790M TP53 p.R273H
74 CP_022_01 EGFR p.E746A750del 3.00% p.E746_A750del COSM6225 阳性参考品 / /
75 CP_022_02 EGFR p.E746A750del 1.00% p.E746_A750del COSM6225 检测限参考品 / /
76 CP_022_03 EGFR p.E746A750del 0.30% p.E746_A750del COSM6225 检测限参考品 / /
77 CP_022_04 EGFR p.E746A750del 0.10% p.E746_A750del COSM6225 检测限参考品 / /
78 CP_023_01 EGFR p.L747_A750>P 3.00% p.L747_E749del COSM12382 阳性参考品 / /
79 CP_023_02 EGFR p.L747_A750>P 1.00% p.L747_E749del COSM12382 检测限参考品 / /
80 CP_023_03 EGFR p.L747_A750>P 0.30% p.L747_E749del COSM12382 检测限参考品 / /
81 CP_023_04 EGFR p.L747_A750>P 0.10% p.L747_E749del COSM12382 检测限参考品 / /
82 CP_024 MET 扩增 3~5 / / 阳性参考品 MET:c.3028+1G>
T
/
83 CP_026_01 EGFR p.EGFR 3.00% p.E746_S752del COSM12385 阳性参考品 TP53:p.Y220C / p.E746_S752>I insI
84 CP_026_02 EGFR p.EGFR
p.E746_S752>I
1.00% p.E746_S752del
insI
COSM12385
检测限参考品
TP53:p.Y220C /
85 CP_026_03 EGFR p.EGFR
p.E746_S752>I
0.30% p.E746_S752del
insI
COSM12385
检测限参考品
TP53:p.Y220C /
86 CP_026_04 EGFR p.EGFR
p.E746_S752>I
0.10% p.E746_S752del
insI
COSM12385
检测限参考品
TP53:p.Y220C /
87 CP_027 EGFR 扩增 3~5 / / 阳性参考品 EGFR:p.E746_A7
50del
/
【使用方法和要求】
1.按照各 KRAS/NRAS/EGFR/ BRAF/MET/PIK3CA 基因突变检测试
剂盒的说明书进行。
2.采用本参考品进行检测时应满足的前提条件:
1)产品检测参考品,其相应的质量控制参数应符合企业声称的
检测控制要求。
2)高通量测序法建库过程中,应不超过 1 个参考品样本的建库
失败。
3.本参考品使用时,应满足:
1)准确性:
对试剂盒检测范围内的阳性参考品进行检测,标注的
KRAS/NRAS/EGFR/ BRAF/MET/PIK3CA基因突变位点和其他突变位
点 1 均应检出。
2)特异性:
a)对阴性参考品进行检测,标注的 KRAS/NRAS/EGFR/
BRAF/MET/PIK3CA 基因突变位点、其他突变位点 1 和其他突变位
点 2 均不应检出。
b)对于试剂盒检测范围外的阳性参考品进行检测,标注的
KRAS/NRAS/EGFR/ BRAF/MET/PIK3CA 基因突变位点、其他突变位
点 1 和其他突变位点 2 均不应检出。
3)检测限:
a)对检测限参考品进行检测:
对试剂盒检测范围内的 1%和 0.3%突变比例检测限参考品进行检
测,标注的 KRAS/NRAS/EGFR/ BRAF/MET/PIK3CA 基因突变位点
和其他突变位点 1 均应检出。
对试剂盒检测范围内的 0.1%突变比例检测限参考品进行检测,
标注的 KRAS/NRAS/EGFR/ BRAF/MET/PIK3CA 基因突变位点和其
他突变位点 1 可检出或未检出。
b)检测限为 0.2%基因突变比例的试剂盒,可选择相同突变类型
0.3%突变比例检测限参考品和 0.1%突变比例检测限参考品等体
积混合配制成 0.2%突变比例检测限参考品。
注:
1)检测限低于 0.1%基因突变比例的试剂盒,可根据试剂盒自身
设置的检测限,选择 0.3%突变比例检测限参考品或 0.1%突变频
率检测限参考品,用相应的野生型正常人血浆样本进行稀释。
2)基因组 DNA 酶切打断形成的片段化 DNA 在后续建库中需进行
末端修复,如建库试剂无末端修复过程建议使用 T4 PNK 磷酸激
酶修复。
【包装】8 mL 螺口管
【贮藏】样本置于-70℃以下保存
【注意事项】
1.本品应在-70℃及以下保存和运输,避免反复冻溶;
2.使用时应待参考品完全融化,并混合均匀后方可加样;
3. 本参考品含有人源样本,原料采用批准的检测试剂检测,HBsAg、
HCV 抗体、HIV-1/2 抗体为阴性。但目前为止还没有任何一种方法能
够完全保证人血源产品不传播病原体,因此应将这些组分作为潜在的
传染源对待,操作应按实验室安全管理条例执行。
4.PCR 操作按照分区进行,使用带滤芯的枪头吸取,防止污染。
5.涵盖 KRAS/NRAS/EGFR/ BRAF/MET/PIK3CA 基因中相关的单基因及多
基因突变检测试剂盒性能评价需采用该参考品全部样本进行检测。
【有效期】国家药品标准物质一般不设具体有效期,按照规定条件保存的标准物质,在中国食品药品检定研究院发布停用通知前有效;或
写明具体日期。
【技术咨询电话】*注:
1. 本参考品为批号 360037-201901 的换批产品。