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平台编号：bio-134966
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拉丁属名： National reference for BCG DNA
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规格：0.1 ml/支
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用途：多糖核酸成品鉴别参考
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注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
卡介菌(BCG)DNA国家参考品
卡介苗（BCG）DNA 国家参考品National reference for BCG DNA
【性状】冻干粉
【用途】本参考品从我国卡介苗生产用工作种子批上海株 D2-甲 12（2）培养的菌体中提取，经多重聚合酶链反应（mPCR）检测卡介菌特异性缺失区 RD1，鉴定为卡介菌 DNA，并经国内有关单位复核验证。供卡介菌菌株、卡介菌核酸类制品鉴别实验用定性参考品。
【包装】安瓿瓶
【规格】3 μg/支
【使用方法和要求】
1、使用方法取本参考品 1 支，加入灭菌超纯水 200 μL 复溶，静置 2-3 min待用。
采用 ET1（5'-AAGCGGTTGCCGCCGACCGACC-3'）、ET2（5'-CTGGCTATATTCCTGGGCCCGG-3'）、ET3（5'-GAGGCGATCTGGCGGTTTGGGG-3'）三条引物，分别以灭菌超纯水稀释至终浓度为 10 μM。取参考品溶液 5 μL，加至 45 μL 反应试剂中【10 倍 PCR 缓冲液（pH8.3 100 mM Tris-HCl，500 mM KCl，15 mMMgCl2）5 μL、dNTP Mixture 2 μL、5 U/μL Taq 酶 0.3 μL、2 μL引物 ET1、4 μL 引物 ET2、2 μL 引物 ET3，灭菌超纯水 29.7 μL】，共 50 μL 反应体系。
反应体系于 94℃预变性 10 min，然后 94℃变性 1 min、64℃退火 1 min、72℃延伸 30 s，循环 30 次后，72℃再延伸 7 min。取 PCR产物 10 μL 加 6 倍上样缓冲液（配方：1、吸取 2 mL EDTA（500 mMpH 8.0）加入约 40 mL 双蒸水；2、再称量 250 mg 溴酚蓝；3、量取50 mL 丙三醇；4、定容至 100 mL，4 度保存）2 μL 混匀，上样于
3%的琼脂糖凝胶泳道，分子量标记物（50 bp DNA ladder ）直接上样 6 μL。于 100 mA 电泳 50 min。根据凝胶成像结果，以 50 bp DNAladder 为分子量标记，观察参考品 PCR 扩增片段分子量大小。
2、判定标准
参考品扩增片段为约 200 bp（测序为 193 bp）的核酸片段，供试品与参考品的扩增条带长度一致。结果判断模式图如下：
S S
注：S 为本参考品，M 为分子量标记
【储藏条件】2-8℃。复溶后-20℃保存，避免反复冻融。
【有效期】国家药品标准物质不设具体有效期，按照规定条件保存的标准物质，在中国食品药品检定研究院发布停用通知前有效。
声明：
1.请按说明书规定使用，若作他用，用户须自行证明适用性；
2.因用户使用或储存不当所引起的损害或投诉，用户自行承担相关责任；
3.用户收到本品后应立即核对品种、数量、包装等，若出现质量、数量等不符，相关赔偿只限于标准物质本身，不涉及其他任何损失
【性状】冻干粉
【用途】本参考品从我国卡介苗生产用工作种子批上海株 D2-甲 12（2）培养的菌体中提取，经多重聚合酶链反应（mPCR）检测卡介菌特异性缺失区 RD1，鉴定为卡介菌 DNA，并经国内有关单位复核验证。供卡介菌菌株、卡介菌核酸类制品鉴别实验用定性参考品。
【包装】安瓿瓶
【规格】3 μg/支
【使用方法和要求】
1、使用方法取本参考品 1 支，加入灭菌超纯水 200 μL 复溶，静置 2-3 min待用。
采用 ET1（5'-AAGCGGTTGCCGCCGACCGACC-3'）、ET2（5'-CTGGCTATATTCCTGGGCCCGG-3'）、ET3（5'-GAGGCGATCTGGCGGTTTGGGG-3'）三条引物，分别以灭菌超纯水稀释至终浓度为 10 μM。取参考品溶液 5 μL，加至 45 μL 反应试剂中【10 倍 PCR 缓冲液（pH8.3 100 mM Tris-HCl，500 mM KCl，15 mMMgCl2）5 μL、dNTP Mixture 2 μL、5 U/μL Taq 酶 0.3 μL、2 μL引物 ET1、4 μL 引物 ET2、2 μL 引物 ET3，灭菌超纯水 29.7 μL】，共 50 μL 反应体系。
反应体系于 94℃预变性 10 min，然后 94℃变性 1 min、64℃退火 1 min、72℃延伸 30 s，循环 30 次后，72℃再延伸 7 min。取 PCR产物 10 μL 加 6 倍上样缓冲液（配方：1、吸取 2 mL EDTA（500 mMpH 8.0）加入约 40 mL 双蒸水；2、再称量 250 mg 溴酚蓝；3、量取50 mL 丙三醇；4、定容至 100 mL，4 度保存）2 μL 混匀，上样于
3%的琼脂糖凝胶泳道，分子量标记物（50 bp DNA ladder ）直接上样 6 μL。于 100 mA 电泳 50 min。根据凝胶成像结果，以 50 bp DNAladder 为分子量标记，观察参考品 PCR 扩增片段分子量大小。
2、判定标准
参考品扩增片段为约 200 bp（测序为 193 bp）的核酸片段，供试品与参考品的扩增条带长度一致。结果判断模式图如下：
S S
注：S 为本参考品，M 为分子量标记
【储藏条件】2-8℃。复溶后-20℃保存，避免反复冻融。
【有效期】国家药品标准物质不设具体有效期，按照规定条件保存的标准物质，在中国食品药品检定研究院发布停用通知前有效。
声明：
1.请按说明书规定使用，若作他用，用户须自行证明适用性；
2.因用户使用或储存不当所引起的损害或投诉，用户自行承担相关责任；
3.用户收到本品后应立即核对品种、数量、包装等，若出现质量、数量等不符，相关赔偿只限于标准物质本身，不涉及其他任何损失