EASYSPIN细菌RNA快速提取试剂盒的提取方法与注意事项！
小杨 / 2024-06-25 08:49:06

 

一、知识概述
 
EASYSPIN细菌RNA快速提取试剂盒采用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后，RNA在高盐状态下选择性吸附于离心柱内玻璃纤维素膜，再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的RNasefreeH20将纯净RNA从玻璃纤维素膜上洗脱。
 
二、产品特点
 
1、离心吸附柱内玻璃纤维素膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
 
2、不使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
 
3、快速简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
 
4、多次过柱漂洗可确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9-2.0，基本无DNA残留，可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。
 
三、使用范围
 
适用于快速提取细菌总RNA。
 
四、提取方法
 
细菌RNA快速提取试剂盒基于独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后，总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的RNaseFreeH2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
 
五、注意事项
 
1、裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
 
2、所有离心操作步骤，均可在室温（15-25℃）下进行。
 
3、提取细菌RNA需先配制加了溶菌酶或者Lysostaphin的TE（10mMTris-HCl，1mMEDTA），TE中已加入溶菌酶或者Lysostaphin，浓度为1mg/mL。
 
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