昆虫杆状病毒表达系统

中国微生物菌种查询网 / 2016-09-05 15:15:27

 通过细胞培养过程生产生物产品已成为全球生物工业的主要支柱,目前,在全世界相关生物技术产品中,使用细胞生产的已超过80%。细胞培养表达生产生物药物产品的工艺已从原来的方瓶、转瓶和滚瓶培养规模发展至目前万升级的工业大规模间歇式生物反应器,甚至是技术更新、效率更高的悬浮连续式反应器;细胞的培养方式也已从过去的固着贴壁式变为悬浮式,从间歇式发展为更先进和更高效率的悬浮连续式;培养介质也从含动物血清培养液发展到先进的无动物蛋白培养液。细胞(昆虫细胞、CHO细胞、BHK细胞、Vero细胞、杂交瘤细胞、动物细胞等)在工程控制和优化条件下的生物反应器中的规模培养,是当前工业化生产各类人畜疫苗、基因治疗病毒载体、重组蛋白质和多肽类药物、单克隆抗体和各类诊断试剂相关产品极为重要的手段。以昆虫细胞为宿主生产病毒杀虫剂或进行基因工程产品的开发,是动物细胞培养领域中很有吸引力的研究方向。作为联系研究和生产的一个环节,昆虫细胞高密度悬浮培养正成为人们研究的热点,传统扁瓶因其体积小、使用方便而成为此类研究中最常用的培养装置,但就其产量来说,根本不能满足产业化的需求。本实验使用转瓶对昆虫/杆状病毒表达系统大规模表达禽流感H7HA重组目的蛋白进行了研究。结果表明:维持27.5℃,转速150rpm,添加10μL肝素钠,以2×10~5～2×10~6cell/mL的密度接种昆虫细胞可通过昆虫/杆状病毒表达系统在转瓶得到大量的具有生物学活性的目的蛋白。本实验从温度,转速,添加表面活性剂,细胞接种密度等指标对昆虫/杆状病毒表达系统规模化表达H7HA重组目的蛋白进行了探索,并为下一步禽流感基因工程亚单位疫苗抗原产业化生产奠定基础。

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